Přehled RNA-Seq DE workflow
POZNÁMKA: Načtení tohoto cvičení může chvíli trvat.
Projdeme si DESeq2 workflow na plném datasetu, který obsahuje jak wildtype, tak smoc2 overexpression vzorky. Knihovny DESeq2 a dplyr jsou už načtené a k dispozici máš také soubor s metadaty all_metadata a soubor se surovými počty all_rawcounts.

Toto cvičení je součástí kurzu
RNA-Seq s Bioconductorem v R
Pokyny k cvičení
- Ověř, že vzorky jsou ve stejném pořadí v
all_rawcountsiall_metadata– použij funkcerownames(),colnames(),all()a operátor%in%. - Vytvoř objekt DESeq2 s vhodným designem, který testuje vliv
conditionpři kontrolegenotype. - Vytvoř objekt DESeq2 s vhodným designem, který kontroluje
genotypeaconditionsamostatně, ale testujegenotype:condition.
Interaktivní cvičení na vyzkoušení si v praxi
Vyzkoušejte si toto cvičení dokončením tohoto ukázkového kódu.
# Check that all of the samples are in the same order in the metadata and count data
all(___(___) %in% ___(___))
# DESeq object to test for the effect of fibrosis regardless of genotype
dds_all <- DESeqDataSetFromMatrix(countData = ___,
colData = ___,
design = ___)
# DESeq object to test for the effect of genotype on the effect of fibrosis
dds_complex <- DESeqDataSetFromMatrix(countData = ___,
___,
___)